很多刚刚接触用高脂饮食构建动物模型的同学,在使用高脂饮食的过程中会遇到一些困惑,也会出现因为使用不当导致实验效果不理想。接下来我们就讲一讲使用高脂饮食需要注意哪些问题,以及提一些实用的小建议。
问题1:我的实验需要购买多少高脂饮食?
答:根据实验周期,可按照每只动物如下计算:小鼠4克/天,地鼠12克/天,大鼠20克/天,豚鼠35克/天,兔子150克/天。如50只C57小鼠,饲喂10周,共计需要:50只×4克×70天=14000克,约需要14公斤饲料。建议如果是自己设计的配方(厂家不做库存),订购时比计划需要量多出5-10%,避免遇到突发情况,实验即将结束却出现断料,重新订购又需要等待生产过程。
问题2:实验开始时如何更换为高脂饮食?
答:提供2种方法,一是采用“7天换食法”,逐步更换为高脂饮食,如下图所示,此方法较为温和,适用于所有品系动物。二是采用“禁食法”,禁食24小时(不禁水)后直接换为高脂饮食,此方法较为激进高效,适用于体质较好的品系,如C57小鼠、SD大鼠等。
问题3:高脂饮食一次给多少量合适?
答:采用“少量多次”的方式,建议一次按3天左右的采食量给料。每只动物的起始给料量按照:小鼠4克/天,大鼠15克/天。如每盒饲养4只小鼠,4只×4克×3天=48克,可以每次添加50克饲料,3天后再根据剩余饮食情况酌情添加,随着实验进行可根据实际采食量酌情增减。
问题4:高脂饮食需要定期更换吗?
答:需要定期更换。不同于普通饲料,由于含有过高的脂肪,长期暴露在空气中,饮食中的脂肪容易氧化变味,致使动物不爱采食。我们建议每周彻底更换一次吃剩余的高脂饮食,可以在每周更换垫料盒时一起丢掉,同时添加新的高脂饮食。
建议1:对照组饮食很重要。
对于设置了对照组的实验,对照组用的饮食要尽量选择与高脂饮食匹配的专用饲料,如60%高脂饮食的对照组10%低脂饮食。因为目前动物房用的普通谷物类鼠料营养水平较高,在实验前期高脂组由于更换饮食、高脂饮食适口性等问题可能会出现体重反而没有对照组高的问题,很多同学会产生疑惑,不过随着实验的进行,高脂组体重会逐渐超过对照组。
建议2:饲养密度需要关注。
目前构建肥胖/糖尿病等模型,普遍选择雄性动物,雄性好斗,如饲养密度过高,会经常发生打斗的情况,这不利于动物体重的增加,造模过程中如发现打斗现象严重,应适当降低饲养密度。
最后祝大家模型构建成功!